光学切片

光学切片是通过适当设计显微镜可以在厚样品内部深处产生焦平面的清晰图像的过程。这用于减少使用切片机等仪器进行薄切片的需求。使用了许多不同的光学切片技术,并且专门设计了几种显微镜技术来提高光学切片的质量。

良好的光学切片(通常称为良好的深度或z分辨率)在现代显微镜中很流行,因为它可以根据在不同焦平面捕获的图像对样品进行三维重建

传统光学显微镜的光学切片

在理想的显微镜中,只有来自焦平面的光才能进入检测器(通常是观察者或CCD),以产生显微镜所聚焦的样品平面的清晰图像。不幸的是,显微镜并非如此,来自焦平面以外的光源的光也到达检测器。在厚样品中,在焦平面和物镜之间可能存在大量物质,因此产生了虚假信号。

光学切片

在不对显微镜进行任何修改的情况下(即使用简单的宽视场光学显微镜),光学切片的质量由与摄影中的景深效果相同的物理学决定。对于高数值孔径的镜头(相当于宽孔径)、景深较小(浅焦点),并且可以提供良好的光学剖面。高倍率的物镜通常比低倍率的物镜具有更高的数值孔径(因此具有更好的光学截面)。油浸物镜通常具有更大的数值孔径,因此可以改善光学截面。

改善光学切片的技术

替代品

光学切片的主要替代方法是:

  • 样品的薄切片,例如用于组织学中的切片。
  • 断层扫描,特别为透射电子显微镜研制。
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