免疫组织化学

免疫组化学 (IHC) 是免疫染色最常见的应用。 它涉及利用抗体与生物组织中抗原特异性结合的原理,选择性地识别组织切片细胞中抗原(蛋白质)的过程。

可以通过多种方式实现抗体-抗原相互作用的可视化,主要是以下任一方式:

  • 显色免疫组织化学 (CIH),其中抗体与酶结合,例如过氧化物酶(该组合称为免疫过氧化物酶),可催化产色反应。
  • 免疫荧光,其中抗体被标记到荧光团,例如荧光或罗丹明。

免疫组织化学染色广泛用于诊断异常细胞,例如在癌性肿瘤中发现的细胞。免疫组化学也广泛用于基础研究,以了解生物标记和差异表达蛋白质在生物组织不同部位的分布和定位

样品制备

样品的制备对于维持细胞形态、组织结构目标表位的抗原性至关重要。 这需要适当的组织收集、固定和切片。 福尔马林溶液通常用于固定组织,但也可以使用其他方法。

样本标签

抗体类型

用于特异性检测的抗体可以是多克隆抗体或单克隆抗体。 多克隆抗体是通过给动物注射感兴趣的蛋白质或肽片段,并在刺激二次免疫反应后,从全血清中分离抗体来制备的。 因此,多克隆抗体是识别多个表位的抗体的异质混合物。 单克隆抗体是通过注射动物,然后采集特定的免疫组织样本,分离亲本细胞,并使用由此产生的永生细胞系来产生抗体来制备的。 这导致抗体显示出对单个表位的特异性。

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